(以下內(nèi)容只是簡單介紹,詳細(xì)情況,可咨詢本公司,)
儀器介紹 :
Tissuelyser-48高通量組織研磨器可以在1分鐘內(nèi)對48個樣本進(jìn)行快速、有效的研磨。它可以用于多種不同材料進(jìn)行碾磨和混合以及均質(zhì)化處理。樣本的種類包括:植物組織、動物組織、細(xì)胞、細(xì)菌和酵母等等。對于提取大通量樣本中的核酸,不但能夠幫助廣大科研用戶從簡單重復(fù)的體力勞動中解放出來,而且大大減少工作量,提高研磨效率和質(zhì)量。
工作原理 :
Tissuelyser-48具有*的碾磨罐或適配器安裝固定系統(tǒng),操作者可以快速、簡單并地將它們定位。
研磨器具有自鎖裝置可以防止碾磨罐或適配器在粉碎過程中松開脫落 ,保障了操作的。
在裝樣本的碾磨罐或離心管中加入小鋼珠,研磨罐或適配器在水平方向上進(jìn)行圓弧式徑向振動,在高頻震動作用下,小球高速擊打樣品來完成樣品的研磨。根據(jù)樣本的不同放入鋼珠的大小和數(shù)量也不相同,球與球之間的摩擦撞擊作用可以有效導(dǎo)致組織或細(xì)胞的破碎。
主要特點:
快速研磨----可以在2-4分鐘內(nèi)對48個樣本進(jìn)行快速、有效的研磨。
低溫研磨環(huán)境----將放有樣品的碾磨罐浸入液氮中冷卻1-2分鐘,取出后移至主機(jī)快速固定即可開始研磨,不需要進(jìn)行再次冷凍處理,節(jié)省液氮。
不易導(dǎo)致交叉污染----使用封閉式碾磨罐或一次性離心管。
高重復(fù)性----同一組織樣本設(shè)定相同程序,獲得相同的研磨效果。
適合多種樣本----植物樣本(水稻、玉米、小麥、豆子、花生等等),動物樣本(肌肉、小腸、心、肝、肺、皮毛、骨頭等等),細(xì)菌和酵母樣本。
操作靈活、簡單----每次可粉碎1-48個樣本,可選擇研磨罐、24孔或48孔適配器;震蕩速度可在3-60HZ之間選擇;按鍵式數(shù)字設(shè)置研磨時間和頻率。
操作說明:(以小鼠肺臟組織為例)
(1) 打開開關(guān),接通電源,檢查電源指示燈“PWR”與連接指示燈“COM”是否顯示正常。
(2) 研磨設(shè)定:按設(shè)置鍵盤SET按鈕進(jìn)行設(shè)定。
①率設(shè)定:根據(jù)組織部位和大小選擇適當(dāng)頻率,一般50-60HZ。此處肺組織為0.5g,設(shè)定頻率為50Hz。
②時間設(shè)定:根據(jù)組織部位和大小選擇適當(dāng)時間,一般為60s-100s。肺組織較軟,不是碎性組織,時間設(shè)定為80s。
設(shè)定完畢后點擊“ENT”鍵進(jìn)行確認(rèn)。
(3) 根據(jù)實驗樣品數(shù)量及組織大小選取24孔或48孔樣品托盤。(24孔板放置5ml離心管,48孔板放置2ml離心管)。此處選擇48孔樣品板及2ml 離心管。
(4) 向準(zhǔn)備好的樣品離心管內(nèi)放入1-2粒鋼珠,關(guān)好離心管蓋。(注:研磨組織與PBS液體總?cè)莘e勿超過離心管總?cè)莘e的2/3,組織與PBS液體積比約為1:3-1:5,此處研磨時加PBS 1ml 以確保充分研磨)。將離心管放入樣品托盤,注意對齊配平。
(5) 將樣品托盤固定在研磨室內(nèi)部軸上,蓋上固定蓋,擰緊固定螺母。蓋上研磨室蓋門,扣好門鎖。
(6) 按下啟動按鈕,此時啟動按鈕顯示綠色,顯示屏?xí)r間顯示運行,等待研磨結(jié)束。
(7) 研磨結(jié)束,打開研磨室蓋門,擰開螺母和固定蓋,取出研磨好的樣品,進(jìn)行后續(xù)實驗。
(8) 若進(jìn)行組織樣品RNA提取,1000rpm離心1分鐘,離去較大組織塊,取250ul上清進(jìn)行RNA提??;若進(jìn)行病毒RNA提取,10000rpm離心2min,取250ul上清進(jìn)行RNA提取。
注:研磨后為保證RNA的量,好迅速提取RNA。如果暫時不提取,可凍至-80冰箱,但盡量避免多次凍融。
如果需提取DNA,擔(dān)心研磨的太碎,可降低相應(yīng)研磨時間為:60S,或工作頻率 45HZ